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技術(shù)文章

艾本德吸頭的使用維護(hù)要點與常見問題解決方案

技術(shù)文章
  一、正確選擇吸頭
  匹配移液器型號
  單道移液器:對于艾本德常見的單道移液器,應(yīng)選擇標(biāo)準(zhǔn)T.I.P.S.系列吸頭。例如,當(dāng)使用 0.5-10μL移液器時,搭配相應(yīng)規(guī)格的標(biāo)準(zhǔn)T.I.P.S.10μL吸頭,能確保吸頭與移液器緊密契合,保證移液的準(zhǔn)確性和密封性。
  多道移液器:若使用艾本德8道或12道多道移液器,優(yōu)先選用ep Dualfit 8/12通道吸頭。以艾本德12道移液器為例,使用ep Dualfit 12通道吸頭,可使每個通道的吸液和排液操作保持一致,避免因吸頭不匹配導(dǎo)致的移液量差異。
  依據(jù)樣本特性選擇
  高粘度液體:當(dāng)移取如甘油等高粘度液體時,普通吸頭可能導(dǎo)致吸液困難和流速過慢。此時應(yīng)選用大口徑吸頭,如5mL規(guī)格的大口徑吸頭,相比普通吸頭,其流速可提升40%,能更順暢地移取高粘度液體,確保移液量的準(zhǔn)確性。
  揮發(fā)性試劑:對于乙醇、丙酮等揮發(fā)性試劑,為防止蒸汽進(jìn)入移液器腐蝕活塞,必須使用帶濾芯的吸頭。艾本德的濾芯吸頭,如ep Dualfilter T.I.P.S雙濾芯吸頭,可有效阻隔揮發(fā)性蒸汽,保護(hù)移液器內(nèi)部結(jié)構(gòu),同時也能防止樣品間的交叉污染。
  滅菌需求:在細(xì)胞實驗等對無菌環(huán)境要求很高的實驗中,需使用預(yù)滅菌吸頭。艾本德的預(yù)滅菌吸頭通常采用滅菌袋包裝,并內(nèi)置COA證書,確保吸頭在使用前處于無菌狀態(tài),滿足細(xì)胞實驗等對無菌操作的嚴(yán)格要求。
  容量匹配原則
  建議移液量在吸頭標(biāo)稱容量的10%-100%之間。例如,移取0.5-10μL樣本時,選擇10μL吸頭,其最小精確移液量可達(dá)0.2μL,能保證在該容量范圍內(nèi)的移液精度;對于100-1000μL樣本,則使用1000μL吸頭,并且在某些情況下,如移取高粘度或易揮發(fā)液體時,采用反向移液模式可進(jìn)一步提升精度。
  二、吸頭的安裝與使用
  安裝方法
  單道移液器吸頭安裝:將移液器末端垂直插入吸頭,輕輕下壓并旋轉(zhuǎn)15°左右進(jìn)行鎖定,確保吸頭安裝牢固。注意切勿上下或左右敲擊,以免損壞移液器的吸頭連接部位或?qū)е挛^安裝不緊密,影響移液準(zhǔn)確性。例如,在使用Research®plus單道移液器時,規(guī)范的安裝操作可使吸頭與移液器緊密貼合,防止漏液現(xiàn)象發(fā)生。
  多道移液器吸頭安裝:將移液器的第一道對準(zhǔn)第一個吸頭,輕壓上緊。以艾本德8道移液器為例,安裝時需確保所有8個吸頭都與移液器對應(yīng)通道緊密連接,同樣不可進(jìn)行敲擊等不當(dāng)操作。安裝完成后,可通過輕輕提拉吸頭,檢查其是否安裝牢固。
  吸液操作
  吸液深度:吸液時,將吸頭垂直浸入液體,一般浸入深度約為1-3毫米。對于不同容量的吸頭,浸入深度也有所差異,如10μL吸頭浸入深度約1-2毫米,1000μL吸頭浸入深度可適當(dāng)增加至2-3毫米。過深可能吸入氣泡或?qū)е挛毫坎粶?zhǔn)確,過淺則可能吸液不足。
  吸液速度:吸液時應(yīng)緩慢平穩(wěn)操作,避免快速吸液。快速吸液容易導(dǎo)致液體飛濺、產(chǎn)生氣泡,影響移液準(zhǔn)確性。特別是在移取微量液體(如0.5μL以下)時,更要注意吸液速度,防止氣泡的產(chǎn)生,因為微量液體中即使微小的氣泡也會顯著影響移液精度。
  預(yù)潤洗吸頭:在移取蛋白質(zhì)類樣本或高粘度、易揮發(fā)液體時,建議進(jìn)行3次預(yù)潤洗。例如,移取細(xì)胞裂解液等高粘度液體前,先用吸頭吸取少量液體,排出后再重復(fù)操作2-3次,這樣可使吸頭內(nèi)壁形成一層液體膜,減少后續(xù)移液時的液體殘留,提高回收率。對于易揮發(fā)液體,預(yù)潤洗吸頭5次以上,可平衡吸頭內(nèi)部的蒸汽壓力,減少因揮發(fā)導(dǎo)致的體積誤差。
  排液操作
  排液角度:分液時,吸頭可輕微傾斜(10°-20°),使液體貼著容器內(nèi)壁流出,減少飛濺。例如,在向試管中排液時,將吸頭傾斜一定角度,可讓液體沿試管壁緩慢流下,避免液體濺出試管外,造成樣品損失或污染實驗環(huán)境。
  排液方式:一般情況下,先將移液器按鈕按到第一檔,打出大部分液體,再按下第二檔,將余液排出。對于一些特殊液體,如粘稠液體,可能需要在第一檔排出大部分液體后,停頓片刻,再按下第二檔排盡余液,以確保吸頭內(nèi)液體排出。
  三、吸頭的維護(hù)與保養(yǎng)
  日常清潔
  每次使用后,應(yīng)及時清潔吸頭。若吸頭僅接觸普通水溶液等無污染液體,可用去離子水沖洗,然后用純凈水漂洗干凈,自然晾干或放入烘箱中低溫烘干(溫度一般不超過60℃)。若吸頭接觸了蛋白質(zhì)、細(xì)胞等生物樣品或有機(jī)試劑等,需用適當(dāng)?shù)娜軇┣逑础@纾佑|蛋白質(zhì)樣品的吸頭,可先用含有蛋白酶的清洗液浸泡一段時間,再用清水沖洗;接觸有機(jī)試劑的吸頭,可用相應(yīng)的有機(jī)溶劑(如乙醇、丙酮等)沖洗,但要注意避免使用強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等腐蝕性溶劑,以免損壞吸頭。
  對于移液器與吸頭連接的部位,如移液器錐套,也需定期清潔。若出現(xiàn)卡頓現(xiàn)象,可用75%乙醇擦拭,但不可使用有機(jī)溶劑,防止對移液器表面造成損傷。
  存儲條件
  吸頭應(yīng)避光保存于15-25℃的環(huán)境中,濕度<65%RH。過高的溫度和濕度可能導(dǎo)致吸頭變形、材質(zhì)老化,影響其使用性能。例如,在高溫高濕的環(huán)境下,吸頭可能會變軟,與移液器的連接密封性變差;而在過于干燥的環(huán)境中,吸頭可能變脆,容易折斷。
  未使用的吸頭應(yīng)保存在原包裝中,避免灰塵等雜質(zhì)污染。對于已開封但未使用完的吸頭,應(yīng)及時密封包裝,防止其受到外界污染。
  定期檢查
  定期檢查吸頭是否有損壞、變形等情況。例如,每次使用前,仔細(xì)觀察吸頭是否有裂縫、缺口,若發(fā)現(xiàn)吸頭損壞,應(yīng)立即丟棄,不可繼續(xù)使用,以免影響移液準(zhǔn)確性或?qū)е乱后w泄漏。
  檢查吸頭與移液器的適配性。隨著移液器的使用,其吸頭連接部位可能會出現(xiàn)磨損,影響與吸頭的連接緊密性。因此,需定期檢查吸頭安裝后是否牢固,有無松動跡象,如有問題,應(yīng)及時對移液器進(jìn)行維修或更換相關(guān)部件。
  四、常見問題及解決方案
  吸頭安裝不牢固
  可能原因:吸頭尺寸不匹配,移液器吸頭口磨損或污染。
  解決方案:使用匹配型號的吸頭,仔細(xì)核對吸頭包裝上標(biāo)注的適用移液器型號。清潔移液器吸頭連接口,可使用干凈的無纖維布蘸取75%乙醇擦拭。若吸頭口磨損嚴(yán)重,應(yīng)聯(lián)系專業(yè)維修人員對移液器進(jìn)行維修或更換損壞部件。
  吸頭內(nèi)出現(xiàn)氣泡
  可能原因:吸液速度過快,吸頭未浸入液體中。
  解決方案:減慢吸液速度,平穩(wěn)操作移液器按鈕。確保吸頭正確插入液體中,保持規(guī)定的浸入深度(1-3毫米)。若吸頭內(nèi)已產(chǎn)生氣泡,可將吸頭從液體中取出,垂直向上,輕輕彈擊吸頭外壁,使氣泡上升至頂部,然后將吸頭重新插入液體中,緩慢釋放按鈕,重新吸取液體。
  液體進(jìn)入移液器內(nèi)部
  可能原因:活塞釋放過快,導(dǎo)致液體回流;移液器傾斜或倒置。
  解決方案:立即停止使用該移液器,拆解移液器,清潔內(nèi)部組件。在操作過程中,避免傾斜或倒置移液器,緩慢釋放活塞,防止液體回流。若液體已進(jìn)入移液器內(nèi)部且造成了腐蝕等損壞,應(yīng)及時聯(lián)系艾本德售后人員進(jìn)行維修,不可自行嘗試修復(fù),以免造成更嚴(yán)重的損壞。
  移液不準(zhǔn)確或重復(fù)性差
  可能原因:體積調(diào)節(jié)不正確,移液器內(nèi)部活塞或密封圈磨損,吸頭未正確安裝。
  解決方案:檢查并重新設(shè)置體積,確保移液器體積調(diào)節(jié)至所需值。更換吸頭,選擇質(zhì)量可靠且適配的吸頭,并正確安裝。對移液器進(jìn)行維護(hù),檢查活塞和密封圈的磨損情況,必要時更換密封圈或活塞。若移液器仍無法正常移液,可將其送至專業(yè)校準(zhǔn)機(jī)構(gòu)進(jìn)行校準(zhǔn)和維修。
  吸頭吸取液體困難
  可能原因:吸頭堵塞,液體粘度太高。
  解決方案:檢查吸頭是否堵塞,若有堵塞物,可嘗試用細(xì)針等工具小心清理,若無法清理干凈,則更換新的吸頭。對于高粘度液體,選擇大口徑吸頭或采用反向移液操作技術(shù)。反向移液操作時,先將按鈕按到第二檔再緩慢釋放完成吸液,這樣會多吸入一些液體,打出液體時只要按到第一檔即可,多余液體可補(bǔ)償吸頭內(nèi)部的表面吸附,以彌補(bǔ)體積偏差。
  正確使用和維護(hù)艾本德吸頭,不僅能確保實驗操作的順利進(jìn)行,提高實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,還能延長吸頭和移液器的使用壽命,降低實驗成本。實驗室操作人員應(yīng)嚴(yán)格按照上述要點進(jìn)行操作,及時解決常見問題,為實驗工作的成功開展提供有力保障。

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